страница_баннер

продукты

Чистое масло Saposhnikovia divaricata для изготовления свечей и мыла, оптовые продажи, эфирное масло для диффузоров, новое для тростниковых курильниц

краткое описание:

 

2.1. Подготовка SDE

Корневища микоризы (SD) были приобретены в сушеном виде у компании Hanherb Co. (Гури, Корея). Таксономическая принадлежность растительного материала была подтверждена доктором Го-Я Чой из Корейского института восточной медицины (KIOM). Контрольный образец (номер 2014 SDE-6) был депонирован в Корейском гербарии стандартных растительных ресурсов. Высушенные корневища микоризы (SD) (320 г) дважды экстрагировали 70% этанолом (с обратным холодильником в течение 2 часов), после чего экстракт концентрировали при пониженном давлении. Отвар фильтровали, лиофилизировали и хранили при температуре 4°C. Выход сухого экстракта из неочищенного исходного сырья составил 48,13% (масс./масс.).

 

2.2 Количественный анализ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)

Хроматографический анализ проводился с использованием системы ВЭЖХ (Waters Co., Милфорд, Массачусетс, США) и фотодиодной матрицы. Для анализа SDE методом ВЭЖХ первичныйO- стандарт глюкозилцимифугина был приобретен в Корейском институте развития традиционной медицины (Кёнсан, Корея), исек-О-глюкозилгамаудол и 4′-O-β-D-глюкозил-5-O-метилвисамминол были выделены в нашей лаборатории и идентифицированы с помощью спектральных анализов, в первую очередь ЯМР и МС.

Образцы SDE (0,1 мг) растворяли в 70% этаноле (10 мл). Хроматографическое разделение проводили на колонке XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 мм, 5μм, Waters Co., Милфорд, Массачусетс, США). Подвижная фаза состояла из ацетонитрила (A) и 0,1% раствора уксусной кислоты в воде (B) при скорости потока 1,0 мл/мин. Использовалась многоступенчатая градиентная программа: 5% A (0 мин), 5–20% A (0–10 мин), 20% A (10–23 мин) и 20–65% A (23–40 мин). Длина волны детектирования сканировалась в диапазоне 210–400 нм, а запись производилась при 254 нм. Объем вводимой пробы составлял 10,0μL. Стандартные растворы для определения трех хромонов были приготовлены в конечной концентрации 7,781 мг/мл (первичн.O-глюкозилцимифугин), 31,125 мг/мл (4′-O-β-D-глюкозил-5-O-метилвисамминол) и 31,125 мг/мл (сек-О-глюкозилгамаудол) в метаноле и хранили при температуре 4°С.

2.3. Оценка противовоспалительной активностиВ пробирке
2.3.1. Культура клеток и обработка образцов

Клетки RAW 264.7 были получены из Американской коллекции типовых культур (ATCC, Манассас, Вирджиния, США) и выращены в среде DMEM, содержащей 1% антибиотиков и 5,5% сывороточного телячьего молока (FBS). Клетки инкубировали во влажной атмосфере с 5% CO2 при температуре 37°C. Для стимуляции клеток среду заменяли свежей средой DMEM с добавлением липополисахарида (ЛПС, Sigma-Aldrich Chemical Co., Сент-Луис, Миссури, США) в концентрации 1%.μг/мл добавляли в присутствии или в отсутствие SDE (200 или 400μг/мл) в течение дополнительных 24 часов.

2.3.2. Определение оксида азота (NO), простагландина E2 (PGE2), фактора некроза опухолиα(ФНО-α) и продукция интерлейкина-6 (ИЛ-6)

Клетки обрабатывали SDE и стимулировали LPS в течение 24 часов. Выработку NO анализировали путем измерения нитрита с использованием реагента Грисса в соответствии с предыдущим исследованием [12]. Секреция воспалительных цитокинов PGE2, TNF-α, а ИЛ-6 определяли с помощью набора для ИФА (R&D systems) согласно инструкции производителя. Влияние СДЭ на продукцию NO и цитокинов определяли при длине волны 540 нм или 450 нм с помощью Wallac EnVision.микропланшетный ридер (PerkinElmer).

2.4 Оценка противоостеоартритной активностиВ естественных условиях
2.4.1. Животные

Самцы крыс Sprague-Dawley (возрастом 7 недель) были приобретены в Samtako Inc. (Осан, Корея) и содержались в контролируемых условиях с 12-часовым циклом света и темноты.°С и% влажности. Крысы получали лабораторную диету и воду.вволюВсе экспериментальные процедуры проводились в соответствии с рекомендациями Национальных институтов здравоохранения (NIH) и были одобрены Комитетом по содержанию и использованию животных Университета Тэджона (Тэджон, Республика Корея).

2.4.2. Индукция ОА с МИА у крыс

Животные были рандомизированы и распределены по группам лечения до начала исследования (на группу). Раствор МИА (3 мг/50μ0,9% физиологический раствор вводили непосредственно во внутрисуставное пространство правого колена под анестезией, вызванной смесью кетамина и ксилазина. Крысы были случайным образом разделены на четыре группы: (1) группа с физиологическим раствором без инъекции MIA, (2) группа с MIA и инъекцией MIA, (3) группа, получавшая SDE (200 мг/кг) с инъекцией MIA, и (4) группа, получавшая индометацин (в/м) (2 мг/кг) с инъекцией MIA. Крысам вводили SDE и в/м перорально за 1 неделю до инъекции MIA в течение 4 недель. Дозировка SDE и в/м, использованная в данном исследовании, основывалась на дозировках, применявшихся в предыдущих исследованиях [10,13,14].

2.4.3. Измерение распределения нагрузки на задние лапы

После индукции остеоартрита исходный баланс несущей способности задних лап нарушался. Для оценки изменений толерантности к нагрузке использовался тестер несостоятельности (Linton Instrumentation, Норфолк, Великобритания). Крыс осторожно помещали в измерительную камеру. Сила нагрузки, прикладываемая к задним конечностям, усреднялась за 3 секунды. Коэффициент распределения веса рассчитывался по следующей формуле: [вес на правую заднюю конечность/(вес на правую заднюю конечность + вес на левую заднюю конечность)] × 100 [15].

2.4.4. Измерение уровня цитокинов в сыворотке крови

Образцы крови центрифугировали при 1500 g в течение 10 минут при температуре 4°C, затем собирали сыворотку и хранили при температуре −70°C до использования. Уровень ИЛ-1β, ИЛ-6, ФНО-αи PGE2 в сыворотке измеряли с помощью наборов ELISA от R&D Systems (Миннеаполис, Миннесота, США) в соответствии с инструкциями производителя.

2.4.5 Количественный анализ ОТ-ПЦР в реальном времени

Тотальную РНК выделяли из ткани коленного сустава с помощью реагента TRI Reagent® (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, штат Миссури, США), проводили обратную транскрипцию в кДНК и ПЦР-амплификацию с помощью набора TM One Step RT PCR с SYBR green (Applied Biosystems, Гранд-Айленд, штат Нью-Йорк, США). Количественная ПЦР в реальном времени проводилась с помощью системы Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Гранд-Айленд, штат Нью-Йорк, США). Последовательности праймеров и зонда представлены в таблице.1Аликвоты кДНК образца и равное количество кДНК GAPDH амплифицировали с помощью универсальной ПЦР-смеси TaqMan®, содержащей ДНК-полимеразу, согласно инструкции производителя (Applied Biosystems, Фостер, Калифорния, США). Условия ПЦР: 2 мин при 50°C, 10 мин при 94°C, 15 с при 95°C и 1 мин при 60°C в течение 40 циклов. Концентрацию целевого гена определяли с помощью сравнительного метода Ct (пороговое число циклов в точке пересечения графика амплификации с пороговым значением) согласно инструкции производителя.


  • Цена FOB:0,5–9999 долл. США / шт.
  • Мин.количество заказа:100 шт./шт.
  • Возможность поставки:10000 шт. в месяц
  • Подробная информация о продукте

    Теги продукта

    Остеоартроз (ОА) является наиболее частым заболеванием опорно-двигательного аппарата и наиболее распространенным дегенеративным заболеванием суставов у пожилых людей.1]. ОА – это состояние, вызванное частично травмой, потерей структуры и функции хряща, а также нарушением регуляции провоспалительных и противовоспалительных путей [2,3]. В первую очередь поражается суставной хрящ и субхондральная кость синовиальных суставов, что приводит к нарушению функции сустава, вызывая боль при нагрузке, в том числе при ходьбе и стоянии [4].

    Лекарства от ОА не существует, поскольку восстановить хрящ после его разрушения очень сложно.5[]. Цели лечения — облегчение боли, поддержание или улучшение подвижности суставов, повышение их прочности и минимизация инвалидизирующих последствий заболевания. Фармакотерапия остеоартрита направлена ​​на уменьшение боли для улучшения функции суставов и качества жизни пациента. Хотя разрушение хряща является основным процессом при остеоартрите, деградация коллагена — фундаментальный фактор, определяющий необратимое прогрессирование остеоартрита в сочетании с воспалением [6,7]. Ожидается, что лечение с противовоспалительной и хондропротективной активностью облегчит боль и сохранит целостность матрикса у пациентов с ОА.

    Следовательно, уменьшение воспаления, вероятно, будет полезным при лечении остеоартрита. Недавние исследования указывают на защитную роль растительных ресурсов в отношении прогрессирования остеоартрита, смягчая воспаление хондроцитов и дальнейшее разрушение хряща благодаря их способности взаимодействовать с тканями, окружающими суставы, что приводит к уменьшению боли в суставах.8].

    КореньСапожниковия растопыреннаяЗонтичные (Schischkin) широко используются в традиционной медицине для лечения головной боли, боли, воспаления и артрита в Корее и Китае.9,10]. Разнообразные фармакологические эффектыСапожниковия растопыренная(SD) также обладают противовоспалительными, анальгетическими, жаропонижающими и противоартритными свойствами [9,11]. Недавнее исследование показало, что экстракт хромона SD обладает потенциальным противоревматоидным эффектом в мышиной модели артрита, вызванного коллагеном [10]; однако было проведено мало исследований, подтверждающих противовоспалительную и противоартритную активностьСапожниковия растопыреннаяэкстракт (SDE).

    Таким образом, в настоящем исследовании изучалась противовоспалительная и противоостеоартритная активность 70%-ного этанолового экстракта СД. В первую очередь оценивался противовоспалительный эффект СДЭ.в пробиркев клетках RAW 264.7, индуцированных ЛПС. Далее антиостеоартритный эффект SDE оценивали, оценивая распределение нагрузки, деградацию суставного хряща и воспалительные реакции в модели ОА у крыс, индуцированного мононатриййодоацетатом (МИА).








  • Предыдущий:
  • Следующий:

  • Напишите здесь свое сообщение и отправьте его нам